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β-淀粉酶測試盒微量法實驗科研

發布時間：2021-04-29   點擊次數：851次

β-淀粉酶測試盒微量法實驗科研
測定意義：淀粉酶負責水解淀粉，主要包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。β-淀粉酶(EC 3.2.1.2)可隨機地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷鍵，生成葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖、糊精等還原糖。

測定原理：還原糖還原3,5-二硝基水楊酸生成棕紅色物質。α-淀粉酶不耐酸，β-淀粉酶不耐熱。根據上述特性，鈍化其中之一，就可測出另一種淀粉酶的活力。


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需要的儀器，耗材:可見分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。

樣本處理
稱取約 0.1g 樣本，加入 0.8mL 蒸餾水，研磨勻漿；將勻漿倒入離心管中，提取液在室溫下放置提取 15min， 每 5min 振蕩 1 次，使其充分提取；6000g，常溫離心 10min，取上清液加蒸餾水定容至 10mL，搖勻，即淀粉酶原 液。
吸取上述淀粉酶原液 1mL，加入 4mL 雙蒸水，搖勻，即為淀粉酶稀釋液，用于（α+β）淀粉酶總活力的測定。